Глицирризин корней лакричника. Исследования японских ученых. Часть 2
4. Абсорбция, Эксрекция
Yano использовал иммунологический анализ, чтобы определить концентрацию Глицирризиновой кислоты (ГК) в крови человека. Данный метод включает в себя микроанализ фармацевтического препарата, использует реакции антиген-антитело и вызывает специфичные не перекрестные реакции. Антисыворотку готовили введением производных глицирретиновой кислоты (ГРК), гаптен, и адъюванта, связанного с сывороточным альбумином, кроликам. ГРК метили β-галактозидом. Флюоресцирующий β-галактозид использовался в качестве субстрата реакции. На Рисунке 11 приведена схема реакции. Эксперимент показал, что в присутствии ГРК в сыворотке (ГК предварительно удаляли гидролизом с помощью минеральной кислоты) антиген и антитело реагировали между собой, тем самым, высвобождая маркер ГРК. Сывороточную концентрацию ГК измеряли по ферментативной активности высвобожденного маркера с субстратом.
Для концентраций в пределах от 2.5 до 4000.0 нг/мл была получена линейная зависимость. Используя данный метод, Yano обнаружил, что внутривенное введение 80г ГК быстро снижала концентрацию ГК в крови. Приблизительно через 6 часов в крови в очень низких концентрациях появлялась ГРК. Через 24 часа уровень ГРК в крови достигал максимума. С другой стороны, при пероральном введении (100 мг) не удавалось обнаружить ГК, т.к. концентрации ГК оставались в пределах погрешности измерений. Но все-таки, сывороточные концентрации ГК были выше, чем после внутривенного введения ГРК и первый пик кривой зависимости наблюдался через 1-4 часа, а второй – через 10-24 часа. (Рисунок 12).
Fujimura измерял сывороточную концентрацию ГК и ГРК у кроликов методом жидкостной хроматографии. Использую жидкостную хроматографию, он выделил ГК из смеси 0.25N водного раствора аммония и 85% этанола (в ряде случаев проводят обработку полиамидом) и ГРК из смеси соляной кислоты и хлороформа. Полученные данные демонстрируют, что после единичного перорального введения ГК (50 мг/кг) максимальная концентрация ГК обнаруживается через 4-6 часов, что касается ГРК, то пиковая концентрация обнаруживается через 8-12 часов. Сывороточная концентрация ГК постепенно увеличивается, если на протяжении 10 последующих дней продолжать вводить ГК, та же самая тенденция наблюдается и в случае ГРК. Далее внутривенно вводили 2 мг/кг и обнаружили, что тестируемое вещество медленно исчезало и образовывалось лишь небольшое количество ГРК. (На Рисунках 12 и 13 показаны результаты эксперимента).
Рис 11. Иммунологический анализ.
Рис 12
Колебание концентраций глицирризиновой кислоты (G) и глицирретиновой кислоты (GA) после орального введения кроликам 50мг/кг моноаммониум глицирризината.
Рис.13
Диаграмма диссипации глицирризиновой кислоты (G) и глицирретиновой кислоты (GA) в сыворотке после внутривенного введения кроликам 2 мг/кг глицирризиновой кислоты.
5. Тест на безопасность.
(1) Кожная аллергическая проба (пач-тест)
--Kazuya Yamamoto, Департамент Дерматологии, Национальная Детская Больница, 30 апреля 1976 г..
1) Тестируемые растворы
G1: Глицирризиновая кислота
G2: Моноаммониум глицирризинат
G3: Дикалий глицирризинат
G4: Дистиллированная вода
(Концентрация растворов G1, G2 и G3 = 5%)
Состав растворов не оглашался до окончания эксперимента.
2) Субъекты для тестирования (волонтеры)
Для данного исследования выбрали 21 здоровую взрослую женщину из персонала Национальной Детской Больницы.
3) Методики
Исследование проводили двойным слепым методом. Проводили обычный пач-тест и фотопач-тест.
Используя пач-тест пластыри (Torii & Co., Ltd.), четыре исследуемых раствора наносили на кожу сгибательной поверхности предплечья, по два на каждую руку. Через сорок восемь часов пластыри снимали и наблюдали воспалительную реакцию.
Затем те же самые участки кожи облучали с помощью Dermaray Model1 (BLB, 15см, 3 мин.) и через сорок восемь часов снова наблюдали воспалительную реакцию.
Метод оценки
Степень воспалительной реакции, наблюдаемой после пач- и фотопач-тестов, оценивали согласно следующим критериям:
· Без изменений: Отрицательная (-)
· Умеренная эритема с нечеткими границами: Умеренно положительная (±)
· Эритема с четко выраженными границами: Положительная (+)
· Эритема, сопровождающаяся отеком, папулами и везикулами: Сильно положительная (++)
4) Результаты
Результаты пач- и фотопач-тестирования четырех исследуемых растворов (G1, G2, G3 и G4) на 20 здоровых взрослых женщинах приведены в Таблице 1.
a. Пач-тест: Никаких изменений не наблюдалось ни на одном исследуемом участке кожи для всех четырех тестируемых растворов. Иными словами, все тестируемые растворы показали отрицательную реакцию у всех субъектов исследования.
b. Фотопач-тест: Никаких изменений не наблюдалось ни на одном исследуемом участке кожи для всех четырех тестируемых растворов. Иными словами, все тестируемые растворы показали отрицательную реакцию у всех субъектов исследования.
5) Выводы
Пач- и фотопач-тесты четырех исследуемых растворов (G1, G2, G3 и G4) проводились на здоровых взрослых женщинах. Ни один из четырех растворов не вызвал кожного воспаления ни в одном из тестов.
После окончания всех экспериментов состав четырех тестируемых растворов был раскрыт.
Таблица 1. Результаты пач- и фотопач-тестов
(1) Токсичность (на мышах)
LD50 1400 мг/кг интраперитонеальная инъекция
LD50 8100 мг/кг оральное введение
6. Клинические исследования
(1) Противовоспалительное действие на кожу человека дикалий глициризината в составе раствора для химической завивки.
Ikeda и соавторы поставили следующий эксперимент. Растворяли дикалий глицирризинат в растворе для химической завивки в концентрации 2% или 4 %. Далее проводили окклюзивный пач-тест на коже человека, чтобы определить супрессивный эффект дикалия глицирризината на раздражение кожи, вызванное раствором для химической завивки. Раствор для химической завивки без добавления дикалия глицирризината использовали в качестве контроля. Тестируемые и контрольный растворы наносили вдоль сгибательной поверхности предплечья в течение 7 часов.
Контрольный раствор вызвал явно выраженное местное раздражение, которое проявилось в виде покраснения кожи, эритемы и опухоли. В отличие от контроля тестируемые растворы вызвали лишь легкие изменения на обработанных участках кожи.
Результаты эксперимента.
(2) Лечение атопического дерматита мазью содержащей дикалий глицирризинат.
-- Отделение педиатрии, Национальная Больница в Тошиги: Медицинские консультации и новые методы лечения, 12 (6) –
Введение
Мазь, содержащую дикалий глицирризинат, наносили на атопический дерматит, самое распространенное детское кожное заболевание, чтобы оценить ее эффективность и безопасность.
Тестируемый лекарственный препарат
Дикалий глицирризиновая мазь – белая эмульсия, содержащая 0,01г (1%) дикалий глицирризината на каждый грамм.
Субъекты исследования и методики
Исследуемыми кожными заболеваниями были в 38 случаях – атопический дерматит, в двух случаях – пеленочный дерматит и в одном случае – простой лицевой питириаз.
Использование любых других дополнительных лекарственных препаратов не разрешалось.
Оценка эффективности
С момента начала лечения и до момента оценки не устанавливалось никаких специальных ограничений. Оценка эффективности проводилась при плановом посещении больницы по следующим критериям:
Критерий оценки симптомов (согласно выбранной системе баллов)
В качестве объективного симптома выбрали наличие или отсутствие сыпи на коже, и ее количество. В качестве субъективного симптома – наличие или отсутствие зуда, а так же степень его выраженности. Количество сыпи и зуд кожи оценивали в соответствии со следующей системой баллов:
Эффективность оценивали на основании изменений шкалы симптомов после лечения дикалий глицирризиновой мазью и до лечения (исходный уровень). Критерии оценки следующие:
Уменьшение по выбранной шкале до ¼ и менее по сравнению с исходным уровнем: Очень эффективно (++)
Уменьшение по выбранной шкале в два раза и менее по сравнению с исходным уровнем: Эффективно (+)
Другие изменения: Не эффективно (-)
Результаты
Подробные результаты исследования по использованию дикалий глицирризиновой мази для лечения 41 ребенка, страдающего от различных кожных заболеваний, показаны в Таблице 1.
Из данных приведенных в Таблице 1 очевидно, что дикалий глицирризиновая мазь очень эффективна в 6 случаях, эффективна в 17 случаях и не эффективна в 18 случаях. Таким образом, лечение в 23 случаях из 41 расценивается как очень эффективное и эффективное, а коэффициент эффективности тестируемого препарата равен 56,1%.
Анализ результатов в зависимости от типа кожного заболевания показал, что при атопическом дерматите в 22 случаях из 38 лечение очень эффективно и эффективно, а коэффициент эффективности составляет 57,9%. В двух случаях с пеленочным дерматитом лечение было эффективно и не эффективно, соответственно. А в единственном случае простого лицевого питириаза лечение расценили, как не эффективное. Однако при исследовании последних двух заболеваний выборка была слишком мала, чтобы выявить какие-либо определенные тенденции.
В 22 случаях атопического дерматита, при которых лечение дикалий глицирризиновой мазью было признано очень эффективным и эффективным, анализировали зависимость успешного лечения от продолжительности использования мази.
Пятнадцать пациентов (68,2%) вылечились более чем за две недели, семерым понадобилось менее двух недель для выздоровления. Из вышесказанного можно сделать вывод, что рекомендованная продолжительность лечения тестируемым препаратом – более двух недель.
У двух пациентов (случай 7 и 38) были отмечены побочные эффекты, покраснение и зуд.
Выводы :
Дикалий глицирризиновая мазь использовалась для лечения 41 ребенка с различными кожными заболеваниями (38 с атопическим дерматитом, двое с пеленочным дерматитом и один с простым лицевым питириазом). Положительный результат был достигнут в отношении объективных и субъективных симптомов.
Из проведенного эксперимента можно сделать вывод, что исследуемый препарат, не содержащий стероидных компонентов, высоко эффективен при лечении экземоподобного дерматоза, основного детского кожного заболевания и имеет доказанное терапевтическое значение, не смотря на то, что у нескольких пациентов наблюдалось ухудшение состояния кожных покровов по сравнению с исходным уровнем.
Любое копирование ЗАПРЕЩЕНО!!!
Yano использовал иммунологический анализ, чтобы определить концентрацию Глицирризиновой кислоты (ГК) в крови человека. Данный метод включает в себя микроанализ фармацевтического препарата, использует реакции антиген-антитело и вызывает специфичные не перекрестные реакции. Антисыворотку готовили введением производных глицирретиновой кислоты (ГРК), гаптен, и адъюванта, связанного с сывороточным альбумином, кроликам. ГРК метили β-галактозидом. Флюоресцирующий β-галактозид использовался в качестве субстрата реакции. На Рисунке 11 приведена схема реакции. Эксперимент показал, что в присутствии ГРК в сыворотке (ГК предварительно удаляли гидролизом с помощью минеральной кислоты) антиген и антитело реагировали между собой, тем самым, высвобождая маркер ГРК. Сывороточную концентрацию ГК измеряли по ферментативной активности высвобожденного маркера с субстратом.
Для концентраций в пределах от 2.5 до 4000.0 нг/мл была получена линейная зависимость. Используя данный метод, Yano обнаружил, что внутривенное введение 80г ГК быстро снижала концентрацию ГК в крови. Приблизительно через 6 часов в крови в очень низких концентрациях появлялась ГРК. Через 24 часа уровень ГРК в крови достигал максимума. С другой стороны, при пероральном введении (100 мг) не удавалось обнаружить ГК, т.к. концентрации ГК оставались в пределах погрешности измерений. Но все-таки, сывороточные концентрации ГК были выше, чем после внутривенного введения ГРК и первый пик кривой зависимости наблюдался через 1-4 часа, а второй – через 10-24 часа. (Рисунок 12).
Fujimura измерял сывороточную концентрацию ГК и ГРК у кроликов методом жидкостной хроматографии. Использую жидкостную хроматографию, он выделил ГК из смеси 0.25N водного раствора аммония и 85% этанола (в ряде случаев проводят обработку полиамидом) и ГРК из смеси соляной кислоты и хлороформа. Полученные данные демонстрируют, что после единичного перорального введения ГК (50 мг/кг) максимальная концентрация ГК обнаруживается через 4-6 часов, что касается ГРК, то пиковая концентрация обнаруживается через 8-12 часов. Сывороточная концентрация ГК постепенно увеличивается, если на протяжении 10 последующих дней продолжать вводить ГК, та же самая тенденция наблюдается и в случае ГРК. Далее внутривенно вводили 2 мг/кг и обнаружили, что тестируемое вещество медленно исчезало и образовывалось лишь небольшое количество ГРК. (На Рисунках 12 и 13 показаны результаты эксперимента).
Рис 11. Иммунологический анализ.
Рис 12
Колебание концентраций глицирризиновой кислоты (G) и глицирретиновой кислоты (GA) после орального введения кроликам 50мг/кг моноаммониум глицирризината.
Рис.13
Диаграмма диссипации глицирризиновой кислоты (G) и глицирретиновой кислоты (GA) в сыворотке после внутривенного введения кроликам 2 мг/кг глицирризиновой кислоты.
5. Тест на безопасность.
(1) Кожная аллергическая проба (пач-тест)
--Kazuya Yamamoto, Департамент Дерматологии, Национальная Детская Больница, 30 апреля 1976 г..
1) Тестируемые растворы
G1: Глицирризиновая кислота
G2: Моноаммониум глицирризинат
G3: Дикалий глицирризинат
G4: Дистиллированная вода
(Концентрация растворов G1, G2 и G3 = 5%)
Состав растворов не оглашался до окончания эксперимента.
2) Субъекты для тестирования (волонтеры)
Для данного исследования выбрали 21 здоровую взрослую женщину из персонала Национальной Детской Больницы.
3) Методики
Исследование проводили двойным слепым методом. Проводили обычный пач-тест и фотопач-тест.
Используя пач-тест пластыри (Torii & Co., Ltd.), четыре исследуемых раствора наносили на кожу сгибательной поверхности предплечья, по два на каждую руку. Через сорок восемь часов пластыри снимали и наблюдали воспалительную реакцию.
Затем те же самые участки кожи облучали с помощью Dermaray Model1 (BLB, 15см, 3 мин.) и через сорок восемь часов снова наблюдали воспалительную реакцию.
Метод оценки
Степень воспалительной реакции, наблюдаемой после пач- и фотопач-тестов, оценивали согласно следующим критериям:
· Без изменений: Отрицательная (-)
· Умеренная эритема с нечеткими границами: Умеренно положительная (±)
· Эритема с четко выраженными границами: Положительная (+)
· Эритема, сопровождающаяся отеком, папулами и везикулами: Сильно положительная (++)
4) Результаты
Результаты пач- и фотопач-тестирования четырех исследуемых растворов (G1, G2, G3 и G4) на 20 здоровых взрослых женщинах приведены в Таблице 1.
a. Пач-тест: Никаких изменений не наблюдалось ни на одном исследуемом участке кожи для всех четырех тестируемых растворов. Иными словами, все тестируемые растворы показали отрицательную реакцию у всех субъектов исследования.
b. Фотопач-тест: Никаких изменений не наблюдалось ни на одном исследуемом участке кожи для всех четырех тестируемых растворов. Иными словами, все тестируемые растворы показали отрицательную реакцию у всех субъектов исследования.
5) Выводы
Пач- и фотопач-тесты четырех исследуемых растворов (G1, G2, G3 и G4) проводились на здоровых взрослых женщинах. Ни один из четырех растворов не вызвал кожного воспаления ни в одном из тестов.
После окончания всех экспериментов состав четырех тестируемых растворов был раскрыт.
Таблица 1. Результаты пач- и фотопач-тестов
(1) Токсичность (на мышах)
LD50 1400 мг/кг интраперитонеальная инъекция
LD50 8100 мг/кг оральное введение
6. Клинические исследования
(1) Противовоспалительное действие на кожу человека дикалий глициризината в составе раствора для химической завивки.
Ikeda и соавторы поставили следующий эксперимент. Растворяли дикалий глицирризинат в растворе для химической завивки в концентрации 2% или 4 %. Далее проводили окклюзивный пач-тест на коже человека, чтобы определить супрессивный эффект дикалия глицирризината на раздражение кожи, вызванное раствором для химической завивки. Раствор для химической завивки без добавления дикалия глицирризината использовали в качестве контроля. Тестируемые и контрольный растворы наносили вдоль сгибательной поверхности предплечья в течение 7 часов.
Контрольный раствор вызвал явно выраженное местное раздражение, которое проявилось в виде покраснения кожи, эритемы и опухоли. В отличие от контроля тестируемые растворы вызвали лишь легкие изменения на обработанных участках кожи.
Результаты эксперимента.
(2) Лечение атопического дерматита мазью содержащей дикалий глицирризинат.
-- Отделение педиатрии, Национальная Больница в Тошиги: Медицинские консультации и новые методы лечения, 12 (6) –
Введение
Мазь, содержащую дикалий глицирризинат, наносили на атопический дерматит, самое распространенное детское кожное заболевание, чтобы оценить ее эффективность и безопасность.
Тестируемый лекарственный препарат
Дикалий глицирризиновая мазь – белая эмульсия, содержащая 0,01г (1%) дикалий глицирризината на каждый грамм.
Субъекты исследования и методики
- Субъекты
Исследуемыми кожными заболеваниями были в 38 случаях – атопический дерматит, в двух случаях – пеленочный дерматит и в одном случае – простой лицевой питириаз.
- Методики
Использование любых других дополнительных лекарственных препаратов не разрешалось.
Оценка эффективности
С момента начала лечения и до момента оценки не устанавливалось никаких специальных ограничений. Оценка эффективности проводилась при плановом посещении больницы по следующим критериям:
Критерий оценки симптомов (согласно выбранной системе баллов)
В качестве объективного симптома выбрали наличие или отсутствие сыпи на коже, и ее количество. В качестве субъективного симптома – наличие или отсутствие зуда, а так же степень его выраженности. Количество сыпи и зуд кожи оценивали в соответствии со следующей системой баллов:
- Интенсивная(ый) ++ 2
- Умеренная(ый) ++ 1
- Слабая(ый) ± 0,5
- Отсутствие - 0
Эффективность оценивали на основании изменений шкалы симптомов после лечения дикалий глицирризиновой мазью и до лечения (исходный уровень). Критерии оценки следующие:
Уменьшение по выбранной шкале до ¼ и менее по сравнению с исходным уровнем: Очень эффективно (++)
Уменьшение по выбранной шкале в два раза и менее по сравнению с исходным уровнем: Эффективно (+)
Другие изменения: Не эффективно (-)
Результаты
Подробные результаты исследования по использованию дикалий глицирризиновой мази для лечения 41 ребенка, страдающего от различных кожных заболеваний, показаны в Таблице 1.
Из данных приведенных в Таблице 1 очевидно, что дикалий глицирризиновая мазь очень эффективна в 6 случаях, эффективна в 17 случаях и не эффективна в 18 случаях. Таким образом, лечение в 23 случаях из 41 расценивается как очень эффективное и эффективное, а коэффициент эффективности тестируемого препарата равен 56,1%.
Анализ результатов в зависимости от типа кожного заболевания показал, что при атопическом дерматите в 22 случаях из 38 лечение очень эффективно и эффективно, а коэффициент эффективности составляет 57,9%. В двух случаях с пеленочным дерматитом лечение было эффективно и не эффективно, соответственно. А в единственном случае простого лицевого питириаза лечение расценили, как не эффективное. Однако при исследовании последних двух заболеваний выборка была слишком мала, чтобы выявить какие-либо определенные тенденции.
В 22 случаях атопического дерматита, при которых лечение дикалий глицирризиновой мазью было признано очень эффективным и эффективным, анализировали зависимость успешного лечения от продолжительности использования мази.
Пятнадцать пациентов (68,2%) вылечились более чем за две недели, семерым понадобилось менее двух недель для выздоровления. Из вышесказанного можно сделать вывод, что рекомендованная продолжительность лечения тестируемым препаратом – более двух недель.
У двух пациентов (случай 7 и 38) были отмечены побочные эффекты, покраснение и зуд.
Выводы :
Дикалий глицирризиновая мазь использовалась для лечения 41 ребенка с различными кожными заболеваниями (38 с атопическим дерматитом, двое с пеленочным дерматитом и один с простым лицевым питириазом). Положительный результат был достигнут в отношении объективных и субъективных симптомов.
Из проведенного эксперимента можно сделать вывод, что исследуемый препарат, не содержащий стероидных компонентов, высоко эффективен при лечении экземоподобного дерматоза, основного детского кожного заболевания и имеет доказанное терапевтическое значение, не смотря на то, что у нескольких пациентов наблюдалось ухудшение состояния кожных покровов по сравнению с исходным уровнем.
Любое копирование ЗАПРЕЩЕНО!!!
Рекомендуемые товары
2 410р
10 050р
Pure Natural Совет: Разлито в бутылочки емкостью 5 мл. Чтобы минимизировать потерю масла советуем ..
2 515р
Теги: ароматерапия, компоненты для косметики,